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【GB 31657.2-2021】蜂蜜中喹諾酮類藥物多殘留的檢測
發(fā)布日期:2024/3/12

蜂蜜中喹諾酮類藥物多殘留的檢測 

SPE-UPLC-MS/MS法

GB 31657.2-2021


喹諾酮類藥物是人工合成的抗菌藥物,因其價格低廉、抗菌作用強被廣泛用于治療畜禽動物的細菌感染疾病。但人體食用含有該類藥物的畜禽產(chǎn)品后,會引起人體分泌系統(tǒng)紊亂、神經(jīng)系統(tǒng)受損,對人體產(chǎn)生一定的危害。因此,國家規(guī)定了畜禽產(chǎn)品中喹諾酮類化合物的最高殘留限量。

迪馬科技參考《GB 31657.2-2021 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 蜂產(chǎn)品中喹諾酮類藥物多殘留的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》,建立了SPE-UPLC-MS/MS法,可測定蜂蜜中喹諾酮類藥物多殘留。本方案使用磷酸鹽緩沖液提取,ProElut® PLS凈化,Endeavorsil® C18色譜柱分離檢測,定量限與標(biāo)準(zhǔn)方法一致,回收率在80%-110%之間。

本方案與GB 31657.2-2021相比,增加30%甲醇水淋洗,這樣可以更好的除去雜質(zhì),提高回收率,同時,洗脫液由之前的甲酸甲醇、乙酸乙酯洗脫,更換為氨水甲醇洗脫,以此減少氮吹對目標(biāo)物的影響,進而提高回收率和靈敏度。

 

01
適用范圍

本方案適用蜂蜜中喹諾酮類藥物多殘留的檢測。

02
標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1) 喹諾酮類混標(biāo)儲備液:由迪馬科技標(biāo)準(zhǔn)品部提供,濃度100μg/mL,溶于甲醇。(Cat.#: 47944)

(2) 喹諾酮類混標(biāo)中間液Ⅰ:準(zhǔn)確吸取適量喹諾酮類混標(biāo)儲備液,用甲醇稀釋并定容,配置成濃度為1μg/mL的混標(biāo)中間液Ⅰ。

(3) 喹諾酮類混標(biāo)中間液Ⅱ:準(zhǔn)確吸取適量喹諾酮類混標(biāo)中間液Ⅰ,用甲醇稀釋并定容,配置成濃度為0.1μg/mL的混標(biāo)中間液Ⅱ。

03
提取

取試樣2g,于50mL離心管中,加磷酸鹽緩沖液*20mL,渦旋1min,振蕩10min, 10000r/min離心5min,取上清,備用。

*磷酸鹽緩沖液:取十二水磷酸氫二鈉7.16g,二水磷酸二氫鈉3.12g,加水800mL使溶解,用磷酸調(diào)pH至3.0,用水稀釋至1000mL。

04
凈化

ProElut® PLS 200mg/6mL (Cat.#: 68012)

(1)活化:用5mL甲醇和5mL水活化;

(2)上樣:備用液全部過柱,棄去流出液;

(3)淋洗:依次用5mL水,5mL 30%甲醇水淋洗,真空抽干5min,棄去流出液;

(4)洗脫:加入5mL 5%氨水甲醇洗脫,并收集洗脫液;

(5)重新溶解:將洗脫液在40℃水浴下氮吹近干(剩余大約0.1mL),用5%乙腈甲酸水*定容到1mL, 混勻,過Nylon膜(Cat.#: 37177),上機分析。 

*5%乙腈甲酸水: 取乙腈5mL,加入0.1%甲酸溶液95mL,混勻。

05
基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

取經(jīng)提取和凈化空白試料,加入適量標(biāo)準(zhǔn)混合溶液,用5%乙腈甲酸水定容1mL,過Nylon膜(Cat.#: 37177),上機分析。

06
分析條件

(1) UPLC條件

色譜柱:Endeavorsil® C18 50x2.1mm, 1.8μm (Cat.#:87002)

流速:0.3mL/min

進樣量:10μL

柱溫:35℃

流動相:A: 0.1%甲酸水  B:甲醇

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(2) 質(zhì)譜條件

電離模式:ESI

掃描方式:正離子掃描

檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測

電噴霧電壓:5500V

霧化氣壓力:50psi

輔助氣壓力:50psi

氣簾氣壓力:20psi

離子源溫度:500℃

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07
添加回收結(jié)果及譜圖

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