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極性改性反相色譜柱的日常維護(hù)

更新日期：2014-10-13 信息來(lái)源：本站瀏覽次數(shù)：2674

極性改性反相色譜柱的日常維護(hù)

正確使用緩沖鹽

緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會(huì)使其析出，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙，使填料板結(jié)，柱壓上升；同時(shí)阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展，使色譜柱的保留能力下降，柱效降低。緩沖鹽析出后，去除非常困難，因此，正確的使用緩沖鹽對(duì)延長(zhǎng)色譜柱使用壽命非常重要。

正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話：使用前要過(guò)渡，使用后要沖洗。具體方法如下：

1. 等度條件：使用緩沖鹽前需用過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min流速?zèng)_洗30min，

使用后去除緩沖鹽的另一個(gè)方法是用過(guò)渡流動(dòng)相以0.2ml/min流速?zèng)_洗

色譜柱過(guò)夜。

2. 梯度條件：用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前，用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min流速?zèng)_洗30min；分析完成后，再用該過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min沖洗色譜柱45min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩，以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出。

注意：過(guò)渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同，區(qū)別只是過(guò)渡流動(dòng)相中不含緩沖鹽。

3. 緩沖鹽析出的補(bǔ)救方法：

1）方案1：用甲醇/水＝20/80以1.0ml/min流速35℃條件下反向沖洗色譜柱120min；

2）方案2：用甲醇/水＝20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過(guò)夜。

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